匿名
2021/2/19 10:59:51
以提取RNA為例。 由于細(xì)胞內(nèi)大部分RNA是以核蛋白復(fù)合體的形式存在，所以在提取RNA的時(shí)候要利用高濃度的蛋白質(zhì)變性劑，迅速破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，使核蛋白與RNA分離，釋放出RNA。再通過酚，氯仿等有機(jī)溶劑處理，離心，使RNA與其他細(xì)胞組分分離，得到純化的總RNA。 在提取的過程中要抑制內(nèi)源和外源的RNase活性，保護(hù)RNA分子不被降解，因此用到?jīng)]有RNA酶活性的異硫氰酸胍。 提取緩沖液中一般含有SDS，酚，氯仿，胍鹽等蛋白質(zhì)變性劑，也能抑制RNase活性。并有助于除去非核酸成分。